免疫反应分为两种类型：先天性和适应性（图 1）。先天免疫系统的细胞以非特异性方式识别和响应病原体。参与免疫反应的多种细胞类型包括树突状细胞 – DC、巨噬细胞、肥大细胞、嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞、B 和 T 淋巴细胞 [1]。抗原呈递细胞 (APC) 吞噬入侵的病原体，消化它们并迁移到局部淋巴结，在那里它们将抗原呈递给幼稚 T 细胞并指导 T 辅助细胞分化为不同的效应细胞（CD8+ T 细胞/Th1；CD4+ T 细胞/Th2）。先天免疫系统可立即防御感染，对于有效诱导适应性免疫至关重要 [2, 3]。相反，适应性免疫涉及由 T 细胞、B 细胞和记忆细胞介导的抗原特异性反应。 T 细胞和 B 细胞分别表达独特的 T 细胞受体 (TCR) 和 B 细胞受体 (BCR)有效地识别多种抗原。当 T 细胞和 B 细胞被激活时，它们会导致杀伤细胞毒性 T 细胞的发育（细胞免疫）和分化的浆 B 细胞产生抗体（体液免疫）。免疫反应的启动需要先天免疫细胞和适应性免疫系统之间的协作。

图 1. 对病原体/佐剂作用的先天和免疫反应。 VaxAlum/SqualVax/IFAVax：(1) 在注射部位募集 APC。 (2)增强抗原摄取。 (3)Th2反应增强。 (4)增强体液免疫反应。 (5)AlumVax：改善巨噬细胞中的 NALP3/inflammasome。

通常使用三种主要类型的疫苗：i) 减毒活疫苗，ii) 灭活疫苗，即热或化学杀死的微生物，以及 iii) 由病原体成分​​（如蛋白质）制成的亚单位疫苗，肽或遗传物质。免疫或疫苗通过产生针对特定病原体的记忆细胞来诱导病原体特异性适应性免疫 [2]。任何疫苗都包含病原体的特定抗原部分，这将引发 T 和 B 淋巴细胞反应并产生记忆细胞。给药后，抗原被 APC 摄取并呈递为肽/MHC 蛋白 I 类或 II 类复合物，其分别结合 T 辅助细胞 CD8+ (Th1) 和 CD4+ (Th2) 的 T 细胞受体 (TcR)。在 APC 的启动下通过 secreti在细胞因子中，T 辅助细胞分化成两个主要的亚型：Th1 和 Th2 细胞。 IL-2 和 IL-12 促进 Th1 分化，导致 INF-g、TNF-a 和 IgG2a 释放和细胞毒性 CD8+ T 细胞增殖。这是对抗细胞内病原体的\"细胞反应”。 IL-1b 和 IL-18 诱导 Th2 分化，导致 IL-4、-5、-6、-10 和 -13 的分泌以及分泌抗体的 B 细胞的增殖：这是保护机体免受侵害的\"体液反应”细胞外病原体。因此，抗原或基因免疫诱导的免疫反应通常可以通过这两种不同的反应来区分：Th1 与 Th2。

针对某些病原体的成功疫苗可能需要增强免疫反应，包括 Th1 细胞介导的免疫或更强大的 Th2 体液反应。

对于抗体产生，强烈的 Th2 反应将是首选。疫苗质量诱导的免疫反应或抗体产生水平将取决于几个因素，包括给药途径、次数和时间、抗原的性质和抗原呈递的质量。佐剂促进了整个过程。事实上，佐剂可以克服大多数蛋白质、肽和 DNA 疫苗（缺乏天然免疫触发因素）的免疫原性差或诱导不适当的免疫反应。因此，佐剂可用于 (1) 增强免疫反应，(2) 通过调节 Th1/Th2 平衡来调整免疫反应，以及 (3) 减少所需的抗原量和诱导保护所需的注射次数（抗原-剂量节约）。

佐剂通常分为两类: 一些成分具有这两种特性的载体和免疫刺激剂。载体通常具有颗粒性质（矿物盐、例如氢氧化铝、乳液、脂质体）。它们以多个拷贝提供选定抗原的展示，模仿微生物的自然展示，并用于将抗原沉积在给药部位或增加其向 APC（微米和纳米颗粒）的递送 [4]。相比之下，免疫刺激剂（TLR 激动剂、皂苷、细胞因子……）直接靶向并激活免疫系统细胞，增强对抗原的免疫反应（图 2）。在这组佐剂中，那些靶向先天免疫系统的病原体识别受体 (PRR) 的佐剂在过去十年中受到了相当大的关注。

PRR 允许先天免疫细胞识别微生物或传染性成分，称为病原体相关分子模式 (PAMP) 和从受伤或垂死细胞释放的成分, 被称为损伤相关分子模式 (DAMPs)。这些 PAMP 和 DAMP 与 PRR 结合，诱导炎症反应，进而增强适应性免疫反应 [5]。 PRR 分为四类：Toll 样受体 (TLR)、Nod 样受体 (NLR)、RIG-1 样受体 (RLR) 和 C 型凝集素受体 (CLR)。几乎所有 PRR 家族成员都被认为是佐剂的受体 [6-9]。一个th第三组佐剂由这些免疫刺激剂与微粒递送载体组合形成，被称为\"佐剂系统”或\"佐剂组合”，正在作为一组最有效的佐剂出现。这组包括 TLR 激动剂与明矾、乳液或脂质体的组合 [10]。

图 2. APC 的佐剂抗原激活。

不完全弗氏佐剂 (IFA) = 强 Th2 免疫反应 + 低 Th1 反应完全弗氏佐剂 (CFA) = 强 Th1 免疫反应

IFAVax 不完全弗氏佐剂 (IFA) 和 CFAVax 完全弗氏佐剂 (CFA)由矿物油和乳化剂的混合物组成的油包水乳液，比例为 85% v/v 油和 15% v/v 乳化剂。与弗氏完全佐剂 (CFA) 相反，IFA 不含热灭活剂分枝杆菌（结核分枝杆菌）。IFA 和 CFA 已广泛用于实验免疫学，IFA 已在实际兽医疫苗接种中使用了几十年。重要的是，弗氏佐剂不是预先形成的乳液，因此它们必须与等体积的水溶液混合抗原溶液，随后在使用前乳化。即使油乳剂的作用机制仍然知之甚少d，一些证据表明部分需要NOD2。此外，这些乳液在注射时容易引起细胞损伤，因此，坏死细胞死亡期间释放的内源性信号也可能有助于它们的佐剂活性。在注射部位吸引巨噬细胞和免疫细胞的分枝杆菌成分的存在显着增强了 CFA 指导的免疫反应。 CFA 主要诱导 Th1 反应，并可在接种部位引起肉芽肿和强烈的炎症反应。事实上，应负责任并谨慎地使用 CFA，以避免或尽量减少过度炎症的不利影响。与主要诱导 Th1 反应的 CFA 不同，缺乏分枝杆菌成分的 IFA 引发 Th2 反应 [11]。对于大多数应用，CFA 通常仅用于初始免疫，而 IFA 是后续免疫的首选佐剂。 IFAVax 和 CFAVax 佐剂是设计的需要持续释放刺激强烈持续免疫反应所必需的抗原。

Alum 是批准的预防性疫苗中最常用的佐剂，因为它具有出色的安全性和增强保护性体液免疫反应 (Th2) 的能力。它由磷酸铝和/或氢氧化铝沉淀物组成，抗原通过疏水和静电相互作用吸附或包埋在沉淀物上。 AlumVax hydroxide 在生理 pH 值为 7.4 时带正电荷并结合酸性蛋白质。另一方面，AlumVax 磷酸盐带负电荷，因此可结合碱性蛋白质。抗原与明矾的结合有利于高局部抗原浓度和 APC 的改进摄取。因此，早期的观察表明，明矾通过延长抗原反应的时间来增强对抗原的反应。可用的。此外，现在承认明矾与许多其他佐剂一样，通过直接激活免疫细胞发挥作用。在小鼠中，明矾诱导极度极化的 Th2 免疫反应，其特征是产生 IL-4 和 IL-5，并强烈诱导抗体产生，如免疫球蛋白 IgE 和 IgG1 [12-13]。因此，明矾对需要 Th2 体液介导免疫的病原体非常有效。同时，单独使用明矾可以激活 NLRP3 炎性体以产生成熟的 IL-1，从而为免疫反应创造有利的环境 [14]。尽管如此;明矾无法诱导与诱导 INF-g 和细胞毒性 T 淋巴细胞相关的 Th1 反应，而后者是清除体内细胞内感染所必需的。

不同的铝盐是包含在许多获得许可的疫苗中（见下表），并且通过使用数十亿剂含铝疫苗，它们的安全性已经得到很好的证实g 接种给从婴儿到老年人的个体的疫苗 [15]。

SqualVax 是一种水包油乳液，由连续水相中的角鲨烯液滴制成。通过添加两种非离子表面活性剂来稳定角鲨烯液滴，这两种非离子表面活性剂广泛用作食品、化妆品和药品中的乳化剂 [16]。它是完全可生物降解的，这与乳化佐剂中使用的替代油相比具有重要优势，例如含有矿物油（石蜡油）的弗氏佐剂，因此在生物体中具有长期持久性。

角鲨烯乳液诱导DC 和粒细胞的局部刺激和募集、单核细胞分化为 DC [17] 以及 APC 对抗原的摄取增加 [18]。乳液更具体地作用于注射部位存在的巨噬细胞。趋化因子释放的局部增加也会影响免疫细胞从血液到疫苗接种部位的募集，从而形成放大环路。这种类型的制剂增强了单核细胞向成熟表型的分化，从而促进了抗原负载细胞向引流淋巴结的迁移。与铝盐相比，会引发更强的免疫反应（例如更高的抗体和 T 细胞反应），并具有混合且更平衡的 Th1/Th2 细胞表型 [17]。角鲨烯乳剂存在于获得许可的季节性和大流行性流感疫苗中。它们增强了老年人等具有挑战性的人群的免疫反应，并且可以促进针对季节性流感病毒的特定漂移变体的免疫反应。包含在疫苗中 [19]。

SqualVax 配方类似于 MF59®（诺华公司的注册商标）。 MF59 仅用于比较目的。 SqualVax™ 并非由诺华公司制造、附属、赞助或认可。诺华公司未评估或批准此处包含的陈述）。

参考书目

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